纳米探针的性能对侧向免疫层析法的检测水平有重要影响。传统方法制备探针的性能常常受到抗体数量、抗体取向、Fab端的免疫活性以及蛋白质和基底之间的结合强度等因素的限制。本研究开发了一种基于蛋白G的、抗体取向修饰的荧光微球探针，结合了SPG特异性靶向抗体Fc端与小分子交联剂共价固定抗体的优势，使抗体高效、定向、牢固地固定在三维载体微球表面。该探针应用于侧向免疫层析技术，诊断心肌梗塞指标cTnI，可显著提高检测的灵敏度，证明了与随机固定的抗体相比，定向固定的抗体有效增强了探针的免疫活性。将该探针应用于侧向免疫层析试纸条，并对试纸条的性能进行了全面评估，评估结果能够满足临床要求，包括最低检出限（0.032 ng/mL），线性（R > 0.99），重复性（CV < 10%），与临床大型生化分析仪的相关性（r> 0.99）以及热加速稳定性（37℃，30天）。除此之外，本研究首次利用异嗜性抗体阻断剂主动封闭蛋白G上的多余位点，以消除假阳性干扰，从而进一步提高了检测结果的灵敏度和准确度。这一快速、灵敏、定量的测量免疫层析方法对于检测对灵敏度要求更高的抗原很有价值，在疾病诊断，食品检验和环境监测方面具有广泛的应用潜力，尤其适合即时诊断（POCT）。
已在Analytical Chemistry在线发表。
论文链接：https://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/acs.analchem.7b05410
研究进展