一种取向固定抗体的方法和原理及其在纳米探针制备中的应用

纳米探针已经在生物医学工程中得到了广泛的应用。然而在一般方法中，抗体通常是方向随机地偶联在纳米颗粒上，抗原识别位点容易被占用或受到空间位阻的影响，导致抗原识别能力降低。现有的抗体取向方法通常比较复杂，或需要对抗体改性，或需要引入新的组分，为此我们开发了一种简单的抗体取向结合在纳米颗粒表面的方法，将抗体在最佳pH值条件下偶联到聚苯乙烯纳米球上，并用于心肌肌钙蛋白I 侧向免疫层析检测。结果表明，抗体的结合量和结合取向以及检测灵敏度都得到了显著提高。虽然调节pH值是优化抗体结合常用的手段,但本文首次说明了该手段增强抗体取向的机制,并揭示了抗体密度、电荷分布和亲疏水性，物理吸附和化学偶联速度以及其他因素对抗体取向的影响。这对理解和调控纳米颗粒表面的抗体方向和构建高效的探针并用于体外诊断具有重要意义。

Doudou Lou, Lu Ji, Lin Fan,Yongxin Ji, Ning Gu*, Yu Zhang*. Antibody-oriented strategy and mechanism for the preparation of fluorescent nanoprobes for fast and sensitive immunodetection. Langmuir, 2019, 35(14):4860-4867.

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.langmuir.9b00150