我们之前的研究发现纳米银可通过激活JNK通路诱导人胶质瘤细胞U251发生自噬，且自噬在将纳米银用于胶质瘤放疗增敏时对细胞起保护作用。在此基础上，我们应用活性氧自由基（Reactive Oxygen Species, ROS）清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）和维生素C（Vitamin C）降低纳米银和6 MV X射线分别/联合作用于U251细胞过程中的ROS生成，发现ROS在纳米银介导的细胞自噬和放射增敏过程中起重要作用。
首先，我们以DCFH-DA为探针，用流式细胞术检测了0.1 mM纳米银作用于U251细胞后细胞中ROS水平的变化，结果显示纳米银可明显促进细胞中ROS的生成，且该作用可被两种抗氧化剂抑制。为了明确ROS的来源，我们对线粒体膜电位（mitochondrion membrane potential, MMP）进行了测定，并用超氧化物特异性染料Mito SOX检测了ROS类型，发现纳米银引起细胞ROS升高的途径是通过造成线粒体损伤而实现的。
随后，我们研究了ROS在纳米银引起自噬和放射增敏过程中的作用，流式细胞术检测细胞凋亡的结果显示用NAC清除细胞中的ROS后，纳米银与放疗分别/联合作用于U251细胞引起的细胞凋亡率均比NAC未处理组有所下降。此外，激光共聚焦、流式及免疫印迹的结果均表明自噬水平升高的过程伴随ROS水平的升高，ROS清除剂可降低各处理组细胞的自噬水平。
结合之前关于放疗中自噬保护作用的发现，我们的研究证明纳米银在作为一种潜在的放射增敏剂使用时，肿瘤细胞中的ROS水平对治疗效果起至关重要的作用。如果能根据不同患者的个体情况针对ROS水平对治疗方案作适当调整，可能会对治疗有一定帮助。而纳米银通过上调ROS水平引起自噬、以及为何抑制自噬对治疗会产生帮助等问题，尚需要进一步的努力。
该文章已在Biomaterials在线，DOI information: 10.1016/j.biomaterials.2016.05.031
